描述：大鼠Ⅳ型膠原（COL4）ELISA試劑盒操作簡(jiǎn)單、結果精確，臻科生物從業(yè)多年一直專(zhuān)心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展，以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù)，贏(yíng)得業(yè)內廣大人士的認可。我司也一直和國內外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系，共同努力合作共贏(yíng)。
一、大鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒詳細介紹
中文名稱(chēng):大鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒
規格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠
檢測波長(cháng):450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研，不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃，六個(gè)月
檢測樣本種類(lèi):用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
臻科生物供應的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實(shí)驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Ⅳ型膠原(COL4)水平。用純化的大鼠Ⅳ型膠原(COL4)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Ⅳ型膠原(COL4)，再與HRP 標記的Ⅳ型膠原(COL4)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅳ型膠原(COL4)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD 值），通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中大鼠Ⅳ型膠原(COL4)濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品（240 pmol/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
四、操作步驟
1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白孔調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
五、試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線(xiàn)，根據樣品的
OD 值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，
即為樣品的實(shí)際濃度。
六、注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn)，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值
大于標準品孔di一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計
算時(shí)請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
七．特別提醒
1.標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能
馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
八．更多優(yōu)勢產(chǎn)品
ZK-03023 小鼠胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
ZK-03024 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
ZK-03025 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒
ZK-03026 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
ZK-03027 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
ZK-03028 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
ZK-03029 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
ZK-03030 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
ZK-03031 小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
ZK-03032 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
ZK-03033 小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
ZK-03034 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
ZK-03035 小鼠17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
ZK-03036 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
ZK-03037 小鼠胰島素樣生長(cháng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
ZK-03038 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒
ZK-03039 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
ZK-03040 小鼠磷脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒
ZK-03041 小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒
ZK-03042 小鼠鑰孔蟲(chóng)戚血藍蛋白(KLH)ELISA試劑盒
ZK-03043 小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒
ZK-03044 小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒
ZK-03045 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
ZK-03046 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒
