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淺述反芻獸疫病毒檢測試劑盒采用熒光探測法檢測的局限性

 更新時(shí)間:2023-02-23 點(diǎn)擊量:356
  小反芻獸疫是由副黏病毒科麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒引起,以發(fā)熱、眼鼻黏膜卡他性炎癥、壞死性口炎、腹瀉和支氣管肺炎為主要特征,包括野生動(dòng)物在內的小反芻動(dòng)物的一種急性、烈性、致死性、高度接觸性傳染病。是嚴重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)安全的重大動(dòng)物疫病。
  小反芻獸疫病毒檢測試劑盒用于檢測羊血清中的PPRV抗體,評估養殖場(chǎng)羊小反芻獸疫疫苗免疫狀況及感染羊的血清學(xué)輔助診斷。試劑盒采用間接ELISA法,在酶標板條微孔上預包被純化的小反芻獸疫抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過(guò)溫育后,若樣品中含有PPRV特異性抗體,則與包被板上的抗原結合,經(jīng)洗滌除去未結合的抗體和其他成分后;再加入酶標二抗,與檢測板上的抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合;再經(jīng)洗滌除去未結合的酶結合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化形成藍色產(chǎn)物,加入終止液終止反應后,用酶標儀450nm波長(cháng)測定反應孔中的吸光度A值。
  小反芻獸疫病毒檢測試劑盒采用熒光探測檢測方法的局限性介紹:
  樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì )出現假陽(yáng)性結果;
  陽(yáng)性對照擴增產(chǎn)物泄漏,會(huì )導致假陽(yáng)性結果;
  樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
  不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì )導致假陰性結果;
  病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì )導致假陰性結果;
  試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;
  本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。